Cary Blair Medium Uzasadnienie, przygotowanie i zastosowania

4905
Robert Johnston

Plik pół Cary Blair jest półstałym agarem, używanym do transportu i konserwacji próbek biologicznych, które są siedliskiem patogenów jelitowych, nietrwałych i beztlenowych mikroorganizmów. Jak każdy środek transportu, jego funkcją jest utrzymanie próbki w optymalnych warunkach do czasu jej wyhodowania. Obecne mikroorganizmy chorobotwórcze, jak również towarzysząca im mikrobiota, muszą pozostać zdolne do życia, ale bez zwiększania swojej populacji..

Podłoże Cary Blair jest wynikiem zmiany składu podłoża Stuart Transport Medium. Modyfikacja została przeprowadzona w 1964 roku i polegała na zastąpieniu układu regulującego pH (glicerofosforan) nieorganicznym buforem fosforanowym..

A. Hodowla z podłożem Cary Blair B. Kolektor stolca z podłożem Cary Blair. Źródło: A. Wideo Meganhow, uzyskaj kulturę rany 2011 youtube.com B. Użytkownik: Mattes [domena publiczna]

Przeformułowanie było konieczne, ponieważ jego twórcy zdali sobie sprawę, że glicerofosforan po pewnym czasie może być metabolizowany przez niektóre bakterie saprofityczne. Te mnożą się nakładają się na obecne patogeny.

Inne zmiany to eliminacja błękitu metylenowego, a także ponowne dostosowanie pH do zasadowości (pH 8,4). Wszystkie te zmiany poprawiły efektywność środków transportu.

Pierwotnie pożywka Cary Blair była używana do utrzymania patogenów jelitowych, takich jak Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae i Campylobacter sp.

Jednak później zaobserwowano skuteczność w zachowaniu żywotności wymagających i labilnych mikroorganizmów chorobotwórczych, takich jak: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae i niektóre beztlenowce.

Indeks artykułów

  • 1 Uzasadnienie
  • 2 Przygotowanie
  • 3 Użyj
    • 3.1 Rodzaj próbek
    • 3.2 Pobieranie próbek
    • 3.3 Identyfikacja próbki
    • 3.4 Przeniesienie
  • 4 Badania przeprowadzone na środkach transportu Cary Blair
  • 5 Kontrola jakości
  • 6 Odnośniki

Podstawa

Podłoże Cary Blair zawiera chlorek sodu, tioglikolan sodu, fosforan disodu, chlorek wapnia i agar.

Chlorek sodu utrzymuje równowagę osmotyczną pożywki, fosforan disodu i chlorek wapnia równoważą pH. Z kolei tioglikolan sodu zachowuje niski potencjał oksydacyjno-redukcyjny, podczas gdy niewielka część agaru zapewnia półstałą konsystencję..

Pożywka Cary Blair nie zawiera substancji odżywczych, ponieważ funkcją podłoża transportowego jest utrzymywanie próbki bez zmiany wilgoci i obciążenia drobnoustrojami; to znaczy zapobiega odwodnieniu próbki, zachowując jednocześnie żywotność i ilość obecnych mikroorganizmów.

Wreszcie lekko zasadowe pH zapobiega śmierci mikroorganizmów przez kwasowość, zwłaszcza Vibrios są bardzo wrażliwe na kwasy.

Przygotowanie

Media Cary Blair są dostępne w handlu jako specjalne, gotowe do użycia urządzenie. System transportowy jest pokryty plastikową torbą Peel Pack. Wewnątrz znajduje się wymazówka do pobrania próbki i probówka na półstałe podłoże Cary Blair..

Na rynku są również domy handlowe, które dostarczają odwodnione podłoże do jego przygotowania w laboratorium..

Aby to zrobić, odważ 13,2 g odwodnionej pożywki i rozpuść ją w jednym litrze wody destylowanej. Podgrzać i wstrząsnąć preparatem do całkowitego rozpuszczenia. Rozprowadź pożywkę do zakręcanych probówek (bakelit).

Paruj probówki przez 15 minut. Ostudź i trzymaj w temperaturze pokojowej do momentu użycia.

Niezaszczepione podłoże Cary Blair można optymalnie przechowywać do 18 miesięcy w temperaturze pokojowej.

PH pożywki należy ustawić na 8,4 ± 0,2. Kolor przygotowanego podłoża to beż z pewną opalizacją.

Posługiwać się

Rodzaj próbek

Podłoże Cary Blair jest używane, gdy próbki kału, wymazu z odbytu i wymazu z pochwy nie mogą być natychmiast przetworzone.

W przypadku braku środków transportu próbki można przechowywać w temperaturze -70 ° C.

Próbowanie

Wymazówka jest impregnowana próbką i jest wprowadzana do pożywki Cary Blair bez sięgania dna.

Identyfikacja próbki

Nośnik Cary Blair musi posiadać etykietę, w której umieszczone są podstawowe dane, takie jak: imię i nazwisko pacjenta, numer identyfikacyjny próbki, źródło pobrania próbki, lekarz prowadzący, data i godzina pobrania próbki. , wstępna diagnoza, antybiotykoterapia.

Transfer

Szczelnie przykryte i przewożone w temperaturze pokojowej w celu pobrania próbek kałuNatomiast w przypadku próbek z pochwy w poszukiwaniu mikroorganizmów beztlenowych zaleca się transport próbek w temperaturze 4 ° C.

We wszystkich przypadkach zalecany czas transferu to 4-6 godzin, maksymalnie 24 godziny..

Jeśli obecność Campylobacter jejuni w próbkach kału, których nie można przetworzyć w ciągu 24 godzin, zaleca się przechowywanie w pożywce Cary Blair w temperaturze 4 ° C.

Badania przeprowadzone na środkach transportu Cary Blair

Kilka badań wykazało, że pożywka Cary Blair może pozostawać zdolna do przetrwania mikroorganizmów enteropatogennych z rodzaju Shigella i Salmonella do 49 dni po pobraniu próbki..

Ze swojej strony, Vibrio cholerae, inny ważny patogen jelitowy jest w stanie przetrwać 22 dni, podczas gdy Yersinia pestis (czynnik wywołujący dżumę dymieniczą i płucną) można wyleczyć po 75 dniach.

Jednak pomimo wykazanej trwałości w zakresie odzysku tych mikroorganizmów, zaleca się jak najszybsze przetransportowanie pobranych próbek w pożywce Cary Blair do laboratorium..

Podobnie, gdy próbka dotrze do laboratorium, należy ją niezwłocznie wysiać do odpowiedniej pożywki hodowlanej..

Z drugiej strony, podłoże Cary Blair, oprócz tego, że jest przydatne do transportu mikroorganizmów fakultatywnych, jest również zalecane do próbek zawierających patogeny beztlenowe..

W tym sensie DeMarco i współpracownicy w 2017 roku przeprowadzili badanie pt .: Przeżycie mikroorganizmów pochwy w trzech dostępnych na rynku systemach transportowych.

Wykazali, że podłoże transportowe Cary Blair jest najlepszym środkiem transportowym do konserwacji i regeneracji mikroorganizmów beztlenowych pochwy. Podobnie wykazali, że najwyższy współczynnik odzysku osiągnięto, gdy temperatura przenoszenia wynosiła 4 ° C..

W związku z tym stwierdza się, że temperatura transportu wymazów z pochwy (mikroorganizmów beztlenowych) powinna wynosić 4 ° C. Podczas gdy w przypadku próbek kału szukających mikroorganizmów fakultatywnych, idealną temperaturą jest temperatura pokojowa..

QA

Szczepy znane jako Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis  ATCC 14028, Vibrio cholerae Y Campylobacter sp.

Pożywkę zaszczepia się wybranym szczepem i utrzymuje w temperaturze pokojowej przez 24 godziny. Następnie wysiewa się je w odpowiednich pożywkach hodowlanych. We wszystkich przypadkach oczekuje się zadowalającego wyzdrowienia danego mikroorganizmu..

Bibliografia

  1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN i wsp. Przeżycie mikroorganizmów pochwy w trzech dostępnych na rynku systemach transportowych. Anaerob. 2017; 45: 44-49.
  2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Porównanie podłoży konserwujących do przechowywania próbek kału. J Clin Microbiol. 1995; 33 (8): 2176-2178.
  3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Porównanie środków konserwujących i warunków zamrażania przy przechowywaniu próbek kału. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151–4.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnoza mikrobiologiczna. 5th ed. Od redakcji Panamericana S.A. Argentyna.
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnoza mikrobiologiczna Bailey & Scott. 12 ed. Od redakcji Panamericana S.A. Argentyna.
  6. Conda Pronadisa Laboratories. Half Cary Blair. Dostępne pod adresem: condalab.com
  7. Laboratorium Metrix. Cary Blair. Dostępne pod adresem: metrixlab.mx

Jeszcze bez komentarzy