Plik Agar BHI Agar z infuzją z mózgu i serca jest trwałym, odżywczym podłożem hodowlanym. W języku hiszpańskim nazywamy go agarem infuzyjnym mózgu i serca. Jest to nieselektywne podłoże hodowlane, co oznacza, że mogą rozwijać się wszystkie rodzaje bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych, a także niektóre drożdże i grzyby strzępkowe..
Składa się z naparu wołowego z mózgu i serca, hydrolizatu peptydowego z tkanek zwierzęcych, trzustkowego hydrolizatu kazeiny, chlorku sodu, glukozy, fosforanu disodu i agaru..
Należy zauważyć, że agar BHI jest jednym z najczęściej stosowanych podłoży hodowlanych w laboratoriach bakteriologicznych. Może być stosowany bez suplementów jako hodowla pierwotna, subkultura kolonii uzyskana na innych pożywkach selektywnych lub do utrzymania szczepów w laboratorium.
Z drugiej strony jest to idealne podłoże do wykorzystania jako baza do przygotowania wzbogaconych podłoży, takich jak agar z krwią i agar czekoladowy. Obydwa są idealne do izolacji wymagających mikroorganizmów z żywieniowego punktu widzenia. Należy jednak zauważyć, że ponieważ zawiera glukozę, nie nadaje się do obserwacji wzorców hemolizy..
Podobnie agar BHI można wykorzystać do przygotowania specjalnych podłoży do izolacji trudnych w uprawie drobnoustrojów chorobotwórczych na zwykłych podłożach, w tym: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae i Histoplasma capsulatum.
Dzięki dodatkowi antybiotykowemu agar BHI staje się selektywnym podłożem do izolacji grzybów.
Indeks artykułów
Jest pożywną pożywką hodowlaną do izolowania średnio wymagających mikroorganizmów, a jej wzbogacenie można zwiększyć poprzez dodanie krwi i innych suplementów diety..
Jest to podłoże nieselektywne, dlatego umożliwia wzrost większości bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych, a także niektórych grzybów. Jednak po dodaniu antybiotyków może stać się selektywny..
Pożywka zawiera wlew wołowy z mózgu i serca, hydrolizat peptydowy tkanki zwierzęcej i hydrolizat kazeiny trzustkowej; wszystkie te związki działają jako źródła witamin, aminokwasów, azotu i węgla.
Glukoza to węglowodan, który dostarcza energię mikroorganizmom po jej sfermentowaniu. Tymczasem chlorek sodu i fosforan disodu utrzymują równowagę osmotyczną i zapewniają pH bliskie neutralności. Wreszcie agar nadaje pożywce stałą konsystencję.
Odważ 52 gramy odwodnionej pożywki i rozpuść w jednym litrze wody destylowanej. Doprowadzić mieszaninę do źródła ciepła do wrzenia, często mieszając podczas procesu rozpuszczania..
Płytki lub kliny agarowe BHI można przygotować bez dodatków.
Aby przygotować kliny, podawaj preparat do napełnienia połowy każdej probówki, przykryj i sterylizuj w autoklawie w temperaturze 121 ° C przez 15 minut, po pozostawieniu połóż na podłożu do zestalenia. Później przechowywać w lodówce do momentu użycia.
Rozpuszczoną mieszaninę autoklawuje się w 121 ° C przez 15 minut, pozostawia do ostygnięcia do 50 ° C i 20 ml pożywki podaje się na sterylne szalki Petriego. Pozostawia się je do zestalenia, odwraca się i przechowuje w lodówce do czasu użycia. Przed wysianiem pozwól płytkom osiągnąć temperaturę pokojową.
PH pożywki musi pozostać na poziomie 7,4 ± 0,2.
Nieprzygotowane podłoże jest koloru beżowego, a przygotowane podłoże ma kolor jasno bursztynowy.
Po sterylizacji pożywkę schłodzić do temperatury około 45–50 ° C, następnie dodać krew (50 ml), delikatnie wymieszać w celu ujednorodnienia i aseptycznie podać 20 ml na każdą szalkę Petriego. Jeśli na płycie utworzą się bąbelki, jaśniejszy płomień musi zostać szybko przepuszczony przez bąbelki, aby je wyeliminować.
Podobnie można przygotować specjalne media, dodając odpowiednie dodatki, gdy mieszanina osiągnie temperaturę 45 do 50 ° C..
Środek jest wiśniowy.
Agar BHI bez dodatków jest przydatny jako kultura pierwotna oraz do wysiewu czystych szczepów drobnoustrojów o niskich lub średnich wymaganiach w celu ich późniejszej identyfikacji..
Ponieważ jest to podłoże o jasnym zabarwieniu, jest idealne do obserwacji pigmentów, a ponieważ nie zawiera substancji interferujących, można na nim wykonać niektóre testy biochemiczne, takie jak oksydaza i katalaza, lub inne testy biochemiczne z kolonii z tego agaru.
Podobnie, kliny agarowe BHI są szeroko stosowane do utrzymania szczepów przez określony czas w laboratorium (bakterioteca).
Płytki lub kliny wysiane na powierzchni ze szczepami bakteryjnymi inkubuje się w 37 ° C przez 24 do 48 godzin. Natomiast w przypadku grzybów temperatura i czas inkubacji będą zależały od rodzaju poszukiwanego grzyba..
Na tej bazie można przygotować pożywki wzbogacone i selektywne.
Jego główną funkcją jest służenie jako podstawa do przygotowania agaru z krwią do rutynowego stosowania w laboratoriach mikrobiologicznych. Szczególnie baza BHI sprzyja izolacji szczepów Streptococcus sp. Jednak ma tę wadę, że nie nadaje się do obserwacji wzorców hemolizy, ponieważ zawiera glukozę..
Jest również stosowany do przygotowania agaru z krwią królika lub konia do izolacji Haemophilus sp. Aby uzyskać lepsze wyniki, można dodać suplement wzbogacający (IsoVitaleX).
Jeśli próbki pochodzą z dróg oddechowych na agar, można dodać bacytracynę w celu zahamowania towarzyszącej flory i zwiększenia prawdopodobieństwa wyzdrowienia szczepów Haemophilus sp.
Z drugiej strony do izolacji można przygotować agar z krwią (jagnięcy lub ludzki) z tellurynem cystyny Corynebacterium diphtheriae. Przydatne jest również przygotowanie agaru z krwią królika, z dodatkiem cystyny i glukozy do izolacji Francisella tularensis.
Płytki z agarem z krwią wysiewa się przez wyczerpanie i inkubuje w temperaturze 35-37 ° C przez 24-48 godzin w warunkach mikroaerofilności (5-10% COdwa).
To podłoże z dodatkiem antybiotyków może zastąpić agar Sabourauda do izolacji grzybów..
Połączenie agaru BHI z chloramfenikolem - gentamycyną lub penicyliną -, streptomycyną i końską krwią jest idealne do izolacji Histoplasma capsulatum.
W zależności od izolowanego mikroorganizmu, zaleca się inkubację w temperaturze 35-37 ° C lub w temperaturze pokojowej w warunkach tlenowych. Czasami konieczna jest inkubacja w obu zakresach temperatur, przy użyciu do tego 2 płytek..
Niektóre grzyby lubią Trichophyton mentagrophytes należy inkubować w temperaturze pokojowej do 7 dni.
Z każdej przygotowanej partii zaleca się inkubację 1 płytki lub klina w 37 ° C przez 24 godziny i sprawdzenie, czy nie ma wzrostu; szczególnie ważne przy przygotowywaniu agaru z krwią, ponieważ jest to podłoże łatwo ulegające skażeniu.
Z drugiej strony jakość podłoża można ocenić, zaszczepiając znane lub certyfikowane szczepy standardowe i obserwując ich rozwój..
W tym sensie, aby ocenić agar BHI bez dodatków, szczepy Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 lub Candida albicans ATCC 10231. Inkubować w temperaturze 37 ° C w aerobiozie przez 24 do 48 godzin. We wszystkich przypadkach oczekuje się zadowalającego wzrostu.
Do oceny płytek agarowych z krwią, szczepy Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 lub Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.
Szczepy bakteryjne inkubuje się w temperaturze 37 ° C w warunkach mikroaerofilności przez 24 godziny, podczas gdy grzyby inkubuje się w temperaturze pokojowej w wilgotnej komorze do 7 dni. We wszystkich przypadkach oczekuje się zadowalającego wzrostu.
Jeszcze bez komentarzy