Plik pętla bakteriologiczna Jest narzędziem roboczym używanym przez mikrobiologów do wysiewu kultur drobnoustrojów (bakterii lub grzybów). Jest to prawdopodobnie instrument najczęściej używany przez tych profesjonalistów.
Jego użycie wydaje się proste, ale w rzeczywistości wymaga wielu szkoleń. Przed rozpoczęciem siewu pętlę należy wysterylizować w palniku Bunsena, a następnie pobrać inokulum drobnoustrojów, które może pochodzić z kultury płynnej lub stałej..
Po pobraniu inokulum można je umieścić na podłożu płynnym lub zaszczepić na podłożu stałym. Po każdym zabiegu pętla jest ponownie sterylizowana. Rączka służy również do wykonywania rozmazów mikrobiologicznych na szkiełku.
Pętla bakteriologiczna ma wiele nazw, w tym: pętla lub pętla platynowa, pętla inokulacji lub pętla do wysiewu, jednak jej prawdziwa nazwa to pętla Kohle..
Materiał, z którego wykonana jest rękojeść, to zazwyczaj stop niklowo-chromowy (nichrom) lub platyna. Inną odmianą dostępną na rynku są plastikowe jednorazowe pętle bakteriologiczne..
Z drugiej strony istnieje kilka rodzajów pętli bakteriologicznych, z których każda spełnia funkcję w ramach zadań wykonywanych przez mikrobiologa. Wybór uchwytu będzie zależał od tego, co należy zrobić.
Na przykład, aby wykonać prążkowie z powodu zubożenia w celu wyizolowania mikroorganizmu, stosuje się pętlę platynową, która kończy się zamkniętym pierścieniem, niezależnie od tego, czy jest skalibrowana, czy nie..
Mając na uwadze, że w przypadku zasiania próbki moczu, gdzie ważne jest ilościowe oznaczenie CFU, konieczne jest użycie kalibrowanej pętli. Podobnie, aby zaszczepić testy biochemiczne, które wymagają zasiania przez nakłucie, niezbędna jest pętla igłowa. Ważne jest, aby uchwyt był obsługiwany przez przeszkolony personel.
Indeks artykułów
Pętle bakteriologiczne składają się z dwóch skrajności. Jeden koniec odpowiada uchwytowi lub podstawie, a drugi samemu uchwytowi.
Podstawa służy do trzymania rękojeści podczas manipulacji. Zwykle jest metalowy, ale ma izolator cieplny, który zapobiega poparzeniu operatora podczas sterylizacji końcówki uchwytu zapalniczki. Mierzy około 20 cm, chociaż może być dłuższy. Posiada gwint do regulacji rączki.
Jest to cel funkcjonalny, czyli część, która styka się z mikroorganizmami i pożywką hodowlaną. Składa się z cienkiego drutu umieszczonego w podstawie.
Uchwyt może być wykonany z nichromu lub platyny, stąd czasami nazywany jest uchwytem platynowym. Ma około 6,5 cm długości i około 0,20 mm. Rączka z rączką może mierzyć 26,5 cm. Pomiary mogą się różnić w zależności od producenta.
Istnieje kilka rodzajów pętli bakteriologicznych, a każda z nich ma określone zastosowanie. Rodzaje rękojeści są następujące: kalibrowana rękojeść w kształcie pierścienia, niekalibrowana rękojeść w kształcie pierścienia, prosta lub igłowa, łopatkowa, w kształcie litery „L” i ostro zakończona rękojeść.
Z drugiej strony uchwyty mogą być trwałe lub jednorazowe. Te do stałego użytku są sterylizowane w zapalniczce, są wielokrotnego użytku i bardzo trwałe. Chociaż artykuły jednorazowe są sterylne w fabryce, są używane tylko raz i są wyrzucane..
Jest to najczęściej używany uchwyt w laboratorium mikrobiologicznym. Służy do pobrania inokulum z zawiesiny drobnoustrojów (pożywka płynna) lub części kolonii (pożywka stała) w celu wysiania na innej pożywce hodowlanej, albo w teście biochemicznym, albo w pożywce bardziej wzbogaconej lub selektywnej, w zależności od przypadku . Przydatne również do wykonywania rozmazów mikrobiologicznych na szkiełku.
W przypadku tego typu pętli początkowe inokulum może zostać pokryte pasmami. Jest również zaprojektowany tak, aby ślizgał się gładko po agarze, nie uszkadzając go. Oczywiście wymaga to przeszkolonego personelu do obsługi techniki siewu, stosowania odpowiedniej siły i ruchów, aby uzyskać dobre prążkowanie..
Za pomocą tego uchwytu można wykonywać różne techniki siewu. Przykład, podłoże stałe na szalkach Petriego jest zwykle wysiewane przez wyczerpanie (istnieje kilka technik, zobacz wideo 1).
Technika ta ma na celu uzyskanie izolowanych kolonii, aby móc je badać i identyfikować, zwłaszcza gdy próbka jest mikrobiologiczna, to znaczy kultura nie jest czysta (zawiera więcej niż jeden rodzaj mikroorganizmu)..
Zamiast tego kliny sadzi się prostym zygzakiem, aby uzyskać masę bakterii, która nie jest w tym przypadku konieczna do izolowania kolonii.
Czasami są również używane do pobierania określonych próbek. Na przykład Rojas i wsp. Wykorzystali pętlę bakteriologiczną do zbierania zeskrobanych próbek tkanki pochwy od szczurów..
Ten uchwyt, jak sama nazwa wskazuje, jest skalibrowany do przyjmowania określonej ilości zawiesiny drobnoustrojów. Jest stosowany, gdy konieczne jest, aby inokulum było zgodne z tym, co jest standaryzowane w technice.
Na przykład bardzo często sadzi się kultury moczu. W takim przypadku można użyć skalibrowanej pętli 0,01 ml i 0,001 ml..
Należy zauważyć, że skalibrowane uchwyty mają margines błędu, który zmienia się w zależności od kąta pobierania próbki i wielkości otworu pojemnika..
Jeśli uchwyt 0,001 ml zostanie włożony pionowo do pojemnika z małym otworem (≤ 7 mm), pobrana ilość będzie o 50% mniejsza niż pożądana.
Dzieje się tak, ponieważ im mniejsza średnica wylotu pojemnika, tym większe napięcie powierzchniowe, a tym samym siły adhezji pomiędzy (szkło - ciecz). To powoduje, że ładunek cieczy przejmowany przez uchwyt jest mniejszy.
Natomiast jeśli jest pobierany pod kątem 45 ° w pojemniku z szerokim otworem (≥ 22 mm), można zebrać 150% więcej niż wymagana ilość. W tym przypadku napięcie powierzchniowe jest niższe i siły kohezji szkło / tworzywo sztuczne maleją, podczas gdy siła kohezji ciecz-ciecz wzrasta..
Z tego powodu w przypadku posiewów moczu czasami preferowane są inne metody oznaczania ilościowego jednostek tworzących kolonie..
Jest również nazywany uchwytem nici. Służy do zaszczepiania niektórych testów biochemicznych, szczególnie tych, które wymagają zaszczepienia techniką nakłucia. Przykład, media półstałe, które są przygotowane w formie bloku, takie jak: nośnik SIM, MIO i O / F.
Ponadto w przypadku MIO i SIM, które oceniają ruchliwość, istotne jest, aby nakłucie wykonać za pomocą pętli igłowej, ponieważ interpretacja dodatniej ruchliwości ma miejsce, gdy bakterie rosną w kierunku boków początkowego inokulum..
Test zaszczepiony pętlą może zafałszować wyniki (fałszywie dodatni). Z tego powodu przy tego typu wysiewie należy uważać, aby nakłucie było niepowtarzalne, a przy jego usuwaniu wychodziło w tym samym kierunku, w którym weszło.
Kolejnym testem, który powinien być wysiewany igłą, mimo że jest przygotowany w kształcie klina, jest Kligler. W tym teście nie zaleca się penetrowania tlenu w głąb agaru, ponieważ do wystąpienia niektórych reakcji chemicznych wymagane jest podłoże ubogie w tlen. Ten uchwyt jest również używany do dotykania określonej kolonii w celu subkultury.
Większość mikroorganizmów tworzy miękkie, łatwe do zrzucenia kolonie. Istnieją jednak pewne czynniki mikrobiologiczne, których kolonie są twarde i suche, na przykład ogólnie prątki i niektóre grzyby. W takich przypadkach przydatne jest użycie łopatki.
Jego najczęstszym zastosowaniem jest brzęczenie kultur grzybów, zwłaszcza pleśni..
Przydaje się do pobierania bardzo małych kolonii obecnych w kulturach wielu drobnoustrojów w celu umożliwienia ich subkultury.
Rękojeść należy wysterylizować przed i po użyciu. Aby wysterylizować bakteriologiczną pętlę w zapalniczce, należy postępować w następujący sposób: rączkę należy umieścić w górnej części płomienia, przyjmując możliwie pionową pozycję, tak aby sterylizować od czubka do góry..
Kiedy cienkie włókno zmieni kolor na jaskrawoczerwony, można powiedzieć, że jest sterylne. Aby go użyć, jest schładzany i pobierana jest wybrana próbka. (Zobacz wideo 2).
Jeszcze bez komentarzy