Plik bulion tryptozowo-sojowy Jest to płynna pożywka hodowlana, silnie odżywcza i nieselektywna. Ze względu na swoją dużą wszechstronność jest jednym z najczęściej stosowanych płynnych pożywek hodowlanych w laboratorium mikrobiologicznym..
Znany jest również pod nazwą bulionu tryptonowo-sojowego lub bulionu trawionego kazeiną i soją, którego skrótem jest TSB od angielskiego akronimu. Tryptic am Rosół lub CST dla jego akronimu w języku hiszpańskim. Jego zastosowania są bardzo zróżnicowane ze względu na swój skład. Składa się z tripteiny, peptonu sojowego, chlorku sodu, fosforanu dipotasu i glukozy.
Jest w stanie rozmnażać ważne klinicznie bakterie chorobotwórcze, w tym bakterie wymagające żywienia i bakterie beztlenowe. W tym środowisku mogą również rozwinąć się niektóre oportunistyczne i zanieczyszczające grzyby.
Ze względu na wysoką wartość odżywczą ma wysoką czułość w wykrywaniu skażenia mikrobiologicznego, dlatego została wybrana przez Służbę Inspekcji Zdrowia Zwierząt i Roślin USDA do analizy mikrobiologicznej szczepionek..
Podobnie bulion sojowy z tryptykazą spełnia wymagania różnych farmakopei (europejskiej EP, japońskiej Japonii i północnoamerykańskiej USP) do badań mikrobiologicznych produktów na poziomie przemysłowym, takich jak kosmetyki i żywność..
Z drugiej strony warto wspomnieć, że pomimo swojej dużej użyteczności podłoże to jest stosunkowo niedrogie, dzięki czemu jest dostępne dla większości laboratoriów mikrobiologicznych. Jest również bardzo łatwy w przygotowaniu.
Indeks artykułów
Tripteina, pepton i glukoza zapewniają niezbędne właściwości odżywcze, dzięki czemu jest to idealne podłoże do szybkiego wzrostu mikroorganizmów.
Po około 6-8 godzinach inkubacji wzrost można już zauważyć u większości mikroorganizmów. Istnieją jednak odmiany wolno rosnące, których wzrost może zająć kilka dni..
Chlorek sodu i fosforan dipotasowy działają odpowiednio jako równowaga osmotyczna i regulator pH. O występowaniu wzrostu świadczy pojawienie się zmętnienia w pożywce; jeśli nie ma wzrostu, pożywka pozostaje przezroczysta.
Dzięki jasnej barwie można zaobserwować produkcję pigmentów, taką jak ta pokazana na obrazku znajdującym się na początku artykułu, co odpowiada pigmentowi produkowanemu przez Pseudomonas aeruginosa.
Aby przygotować bulion sojowy tryptykazowy, należy odważyć 30 g odwodnionej komercyjnej pożywki na wadze cyfrowej. Następnie rozpuszcza się w litrze wody destylowanej zawartej w kolbie.
Mieszaninę odstawia się na 5 minut, a następnie przenosi do źródła ciepła, aby ułatwić rozpuszczenie pożywki. Należy często mieszać, gotując przez 1 minutę.
Po rozpuszczeniu rozdziela się do probówek o odpowiedniej wielkości, w zależności od potrzeb. Można używać probówek z bawełnianymi zatyczkami lub z nasadkami z bakelitu. Następnie probówki sterylizuje się pożywką w autoklawie w 121 ° C przez 15 minut..
PH pożywki musi pozostać na poziomie 7,3 ± 0,2
Należy zauważyć, że odwodniona pożywka hodowlana jest koloru jasnobeżowego i powinna być przechowywana w temperaturze od 10 do 35 ° C w suchym miejscu. Przygotowany bulion ma jasnobursztynowy kolor i należy go przechowywać w lodówce (2 do 8 ° C).
Zmodyfikowany bulion sojowy tryptykazyny można przygotować przez dodanie soli żółciowych i nowobiocyny w celu nadania mu selektywności do izolacji E coli. Inną opcją w tym samym celu jest przygotowanie bulionu tryptykazowo-sojowego uzupełnionego wankomycyną, cefiksymem i tellurynem (2,5 µg / ml)..
Z drugiej strony, więcej glukozy (0,25%) można dodać do bulionu tryptozowo-sojowego, jeśli celem jest stymulowanie tworzenia się biofilmów..
Jest wystarczająco pożywny, aby umożliwić rozwój wybrednych lub wybrednych bakterii, takich jak Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp i Brucella sp, nie ma potrzeby uzupełniania krwi lub surowicy.
Podobnie, w tym bulionie mogą rozwijać się niektóre grzyby, takie jak Kompleks Candida albicans, Aspergillus sp i Histoplasma capsulatum.
Ponadto pożywka ta w warunkach beztlenowych jest idealna do odzyskiwania bakterii z rodzaju Clostridium, a także niezarodnikujących bakterii beztlenowych o znaczeniu klinicznym..
Jeśli doda się 6,5% chlorek sodu, może być stosowany do wzrostu Enterococcus i innych paciorkowców z grupy D..
Na poziomie badawczym okazał się bardzo przydatny w różnych protokołach, zwłaszcza w badaniu biofilmu lub bakterii tworzących biofilm. Służy również do przygotowania 0,5% zawiesiny bakterii Mac Farland, niezbędnej do wykonania antybiogramu metodą Kirby'ego i Bauera..
W tym przypadku pobiera się od 3 do 5 kolonii o podobnym wyglądzie i emulguje w 4-5 ml bulionu sojowego tryptykazyny. Następnie inkubuje się przez 2 do 6 godzin w temperaturze 35-37 ° C, a następnie doprowadza do żądanego stężenia za pomocą sterylnej soli fizjologicznej. Bulionów sojowych z tryptykazą nie należy używać od 18 do 24 godzin inkubacji.
Próbkę można wysiewać bezpośrednio lub można przeprowadzić subhodowlę czystych kolonii pobranych z pożywek selekcyjnych. Inokulum powinno być małe, aby nie zmętnić podłoża przed inkubacją.
Zwykle inkubuje się go w temperaturze 37 ° C w warunkach tlenowych przez 24 godziny, ale warunki te mogą się różnić w zależności od poszukiwanego mikroorganizmu. W razie potrzeby można go również inkubować w warunkach beztlenowych w temperaturze 37 ° C przez kilka dni. Na przykład w przypadku drobnoustrojów wymagających lub wolno rosnących może być inkubowany do 7 dni.
W analizie mikrobiologicznej substancji farmaceutycznych - takich jak szczepionki - protokoły są bardziej rygorystyczne. W takich przypadkach bulion bez wzrostu nie jest wyrzucany, dopóki nie osiągnie 14 dni ciągłej inkubacji..
Z każdej przygotowanej partii 1 lub 2 niezaszczepione probówki należy inkubować w celu wykazania ich sterylności. Musi pozostać niezmieniona.
Można również posadzić znane szczepy, aby ocenić ich zachowanie. Wśród szczepów, które można wykorzystać, są:
Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 lub 25923, Escherichia coli ATCC 8739, Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.
We wszystkich przypadkach wzrost musi być zadowalający w warunkach odpowiedniej atmosfery i temperatury dla każdego mikroorganizmu..
-Fermentacja glukozy powoduje spadek pH pożywki z powodu produkcji kwasów. Może to być niekorzystne dla przeżycia niektórych mikroorganizmów wrażliwych na kwasowość..
-Nie jest zalecany do utrzymania szczepów, ponieważ oprócz kwasowości bakterie po kilku dniach wyczerpują składniki odżywcze, co w konsekwencji powoduje gromadzenie się toksycznych substancji, które czynią środowisko niegościnnym.
-Musisz dbać o wszystkie protokoły dotyczące sterylności, ponieważ buliony są łatwo zanieczyszczone.
-Po przygotowaniu bulionów z tryptykazyną sojową nie należy próbować przenosić bulionu do innej sterylnej probówki, ponieważ ten typ manewru jest bardzo podatny na skażenie..
Jeszcze bez komentarzy