Plik Rozmaz krwi Jest to rozmaz krwi obwodowej, który służy do analizy składników obecnych w krwiobiegu. Obserwacja rozmazu krwi dostarcza danych hematologicznych, które są bardzo przydatne w diagnostyce i leczeniu wielu patologii..
Rozmaz krwi pozwala na ilościowe określenie liczby różnych typów białych krwinek (wzór leukocytów), a także pozwala na analizę morfologii i kształtu erytrocytów, leukocytów i płytek krwi.
Może wykryć nieprawidłowości w liczbie komórek, takie jak: leukocytoza lub leukopenia, limfocytoza lub limfopenia, neutrofilia lub neutropenia, trombocytoza lub trombocytopenia i eozynofilia. Można również zauważyć nieprawidłowości w kształcie i wielkości komórek..
Dodatkowo można wykryć różnego rodzaju anemie, białaczki, infekcje bakteryjne lub pasożytnicze krwi..
W tym celu wykonuje się różne rodzaje rozmazów w zależności od celu badania. Są cienkie i grube rozmazy. Te rozmazy różnią się techniką wykonania i celem badania..
Te z drobnymi kroplami są używane jako dodatek do pełnej hematologii. Zapewnia to dane na temat formuły leukocytów, oprócz analizy kształtu i morfologii trzech serii komórek tworzących krew: serii czerwonej, białej i płytek krwi. Chociaż służą również jako uzupełnienie badania grubego filmu krwi.
Gruby film krwi służy do diagnostyki chorób wywoływanych przez hemopasożyty, takich jak malaria lub malaria, toksoplazmoza, leiszmanioza, choroba Chagasa, babeszjoza i mikrofilarioza.
Indeks artykułów
Dobry rozmaz krwi musi spełniać określone cechy. Wśród nich możemy wymienić:
-Aby próbka była reprezentatywna, musi spełniać minimalne wymagania jakościowe.
-Pobieranie próbek musi być dobrze przeprowadzone.
-Terminowe wykonanie rozmazu.
-W przypadku wykonywania z krwią żylną należy zastosować antykoagulant, który nie powoduje deformacji komórek i wymieszać rurkę przed pobraniem rozmazu..
-Jeśli jest to zrobione z krwią włośniczkową, odrzuć pierwszą kroplę.
-Rozprzestrzenianie się musi być jednorodne. Zapewnia to równomierne rozmieszczenie komórek i umożliwia dobrą analizę krwinek pod względem kształtu i liczby..
-Boki mazi powinny być gładkie od początku do końca.
-Rozmaz powinien zachowywać margines od 1 do 2 mm po bokach szkiełka.
-Grubość warstwy mazistej powinna stopniowo zmniejszać się od początku do końca (smar cienkowarstwowy metodą szkiełkową).
-Musi być odpowiednio oznakowana, aby uniknąć pomyłki z próbką.
-Odpowiednio utrwalić i zabarwić w celu wyraźnej obserwacji elementów krwi.
-Przed zamontowaniem preparatu pod mikroskopem odczekać, aż rozmaz bardzo dobrze wyschnie. Nałożenie olejku immersyjnego na mokry rozmaz spowoduje tworzenie się miceli, które uniemożliwiają widoczność komórek..
Rozmaz krwi obwodowej można podzielić na cienki i gruby. Te z cienką warstwą służą do badania formuły leukocytów i morfologicznej obserwacji krwinek. Można również zobaczyć bakterie zewnątrzkomórkowe, takie jak borrelia i hemopasożyty wewnątrzkomórkowe, takie jak między innymi plasmodium..
W drobnej plamce można zidentyfikować gatunek pasożyta, dlatego jest to bardziej specyficzna technika niż gruba kropelka, ale gruba kropelka jest bardziej wrażliwa, ponieważ jest to technika koncentracji wykorzystywana do wyczerpujących poszukiwań zewnątrzkomórkowych hemopasożytów..
Istnieją dwa rodzaje rozmazów w drobnych kroplach: na szkiełkach nakrywkowych i na szkiełkach nakrywkowych. Na szkiełkach wykonuje się grube rozmazy.
Rozmaz krwi można wykonać z nakłucia włośniczkowego lub próbki żylnej pobranej z antykoagulantem. Jeśli jest to zrobione z krwi z antykoagulantem, rozmaz można przygotować do 2 godzin po pobraniu próbki..
Należy zachować ostrożność przy stosowaniu antykoagulantów, które nie powodują deformacji krwinek. Najlepszą opcją jest EDTA. Wręcz przeciwnie, należy unikać stosowania antykoagulantów, takich jak cytrynian trójsodowy..
Jeśli próbka jest pobierana przez nakłucie kapilarne, rozmaz należy przedłużyć natychmiast, zanim skrzepi się krew.
Pierwszą kroplę należy wyrzucić, umożliwiając spontaniczne wypłynięcie następnej kropli, aby uniknąć rozcieńczenia próbki płynem tkankowym. Jest to najbardziej zalecana technika do obserwacji morfologii komórek, ponieważ krew nie zawiera żadnych dodatków.
Do obserwacji hemopasożytów Solari i wsp. W swoich badaniach doszli do wniosku, że obie techniki (nakłucie żyły i naczynia włosowate) są równie skuteczne..
Rozmaz krwi można wykonać ręcznie na szkiełkach mikroskopowych lub na szkiełku nakrywkowym lub szkiełku nakrywkowym. Jest to również możliwe dzięki zautomatyzowanemu wyposażeniu.
Jest to technika preferowana przez większość laboratoriów ze względu na łatwą obsługę.
Używając pipety Pasteura, umieść niezbyt grubą lub bardzo cienką kroplę krwi na środku jednego końca czystego szkiełka mikroskopowego..
Rozmaz wykonuje się za pomocą innego szkiełka ze szlifowanym końcem. Szkiełko szlifowane jest umieszczane prostopadle do przeciwległego końca kropli..
Przechyla się pod kątem między 30 - 45 ° i ślizga się w kierunku spadku; Po dotknięciu rozszerza się liniowo poza krawędź ślizgu podłoża i przy stałym i określonym ruchu powraca arkusz; przed dotarciem do końca zjeżdżalnia jest podnoszona.
W ten sposób jednorodna warstwa jest rozprowadzana na powierzchni suwaka przyjmującego..
Rozmaz może wyschnąć. Następnie jest utrwalany i barwiony preferowaną bejcą. Przed obejrzeniem pod mikroskopem pozostaw do wyschnięcia. Kropla olejku jest umieszczana na twarzy, która przedstawia rozmaz i jest obserwowana pod mikroskopem świetlnym.
W tego typu wymazie można wyróżnić trzy określone obszary: głowę, tułów i ogon. Głowa odpowiada obszarowi, w którym zaczyna się rozmaz, jest to najgrubszy obszar i nie jest dobrze go obserwować.
Ciało jest centralną lub pośrednią częścią rozmazu, jest to najlepszy obszar do obserwacji pod mikroskopem, ponieważ komórki są tam równomiernie rozmieszczone i zachowana jest ich morfologia.
Ogon odpowiada końcowej części rozmazu; tutaj rozkład nie jest już jednolity, a morfologia erytrocytów ma tendencję do zaniku.
W tej technice odgrywa fundamentalną rolę:
-Czyszczenie i odtłuszczanie szkiełka mikroskopowego: zapewnia dobre ślizganie preparatu.
-Wielkość kropli: przy bardzo dużych kroplach uzyskany zostanie grubszy i dłuższy rozmaz, przy bardzo małej kropli rozprysk będzie krótszy i wyjątkowo drobny.
-Prędkość zastosowana w przedłużeniu: im niższa prędkość rozmaz będzie cieńszy, tym większa prędkość będzie grubszy.
-Kąt wykonania: im mniejszy kąt, tym drobniejszy rozmaz, im wyższy kąt, tym grubszy.
Nie jest szeroko stosowany, ponieważ obchodzenie się z delikatnymi szkiełkami nakrywkowymi jest uciążliwy, jednak oferuje duże korzyści, ponieważ uzyskuje się lepsze rozmieszczenie komórek w całym rozmazie..
Niezbyt grubą lub bardzo drobną kroplę umieszcza się na środku szkiełka nakrywkowego. Natychmiast umieszcza się na nim kolejny szkiełko nakrywkowe w taki sposób, że końce obu szkiełek odstawiają, tworząc gwiazdę.
Kropla spontanicznie rozprzestrzeni się po powierzchni obu szkiełek nakrywkowych. Na końcu przedłużenia każda lamela przesuwa się szybko na przeciwną stronę (jedna w prawo, a druga w lewo).
Technika zapewnia dwa rozmazy zamiast jednego.
Są one umieszczane do wyschnięcia rozłożoną stroną do góry. Po wyschnięciu jest utrwalany i barwiony wybraną techniką. Niech wyschnie. Kroplę olejku immersyjnego umieszcza się na szkiełku, rozmaz umieszcza się stroną rozmazaną do dołu i obserwuje pod mikroskopem..
Aby uzyskać dobry rozmaz do tej techniki, ważne jest, aby:
-Czyszczenie szkiełek nakrywkowych (pomaga w dobrym ślizganiu próbki).
-Wielkość kropli (wpływa na grubość rozmazu).
-Szybkość, z jaką oddzielane są szkiełka nakrywkowe (wpływa na jednorodność rozmazu).
Można to zrobić za pomocą dowolnego z tych urządzeń: Spinner i Autoslide.
Spinner polega na umieszczeniu szkiełka z kroplą krwi na specjalnej płytce wirówkowej. Próbka jest odwirowywana z dużą prędkością; w ten sposób powstaje jednorodna i delikatna smuga próbki. Wadą jest możliwość hemolizy próbki.
Autoslide to instrument, który mechanicznie wykonuje ruchy w celu wykonania wymazu na szkiełkach. Możesz również naprawić i zabrudzić rozmaz. Można go nawet dostosować do niektórych automatycznych liczników hematologicznych.
W celu wyszukania hemopasożytów zaleca się wykonanie dwóch wymazów: jednego z drobną kroplą i drugiego z grubą kroplą..
Wykonaj nakłucie kapilarne, wyczyść pierwszą kroplę. Umieść drobną kroplę na szkiełku i rozmazuj, jak wyjaśniono wcześniej. Aby uzyskać grubą kulkę, umieść dużą kulkę na innym szkiełku i rozprowadź w kwadracie 1,55 mm. Niech oba smugi wyschną.
Dla tych z drobnymi kroplami można zastosować między innymi plamy Giemsa lub Wright. Giemsa lub May-Grunwald Giemsa polecana jest do grubych rozmazy.
Rozmaz utrwala się przez 3 minuty metanolem, odsącza i ponownie wysycha. Następnie rozmaz jest przykrywany plamą Giemsa na 10-15 minut. Myje się wodą destylowaną i pozostawia do wyschnięcia. Aby obserwować pod mikroskopem, umieszcza się kroplę olejku immersyjnego.
Rozmaz jest pokryty plamą Wrighta przez 5 minut. Wyrzucić i umieścić roztwór buforowy o pH 6,8 na 6 minut. Przedmuchać preparat do homogenizacji. Umyć wodą destylowaną i pozostawić do wyschnięcia. Obserwuj pod mikroskopem.
Występuje u osób trenujących technikę drobnego upuszczania ze zjeżdżalniami.
Dzieje się tak, ponieważ wykonywany ruch nie był stały podczas rozprzestrzeniania, powodując zatrzymanie i ponowne uruchomienie.
Mają 2 przyczyny: jedna wynika z faktu, że zjeżdżalnia gruntowa została podniesiona przed osiągnięciem drugiego końca zjeżdżalni. W tym przypadku jest wyjątkowo gruby i krótki.
Z drugiej strony, jeśli rozmaz jest krótki, ale cienki, to dlatego, że wielkość kropli była bardzo mała..
Przyczyn jest kilka: jedna z nich to uszkodzenie krawędzi szlifowanej, zwiększenie nacisku na suwak przyjmujący w momencie rozpierania lub zużycie krawędzi szlifowanej suwaka.
Wynikają z użycia tłustych smug (słabo umytych i odtłuszczonych).
Krople, które są zbyt duże, będą dawały bardzo grube smugi od początku do końca, a bardzo małe krople będą dawały bardzo cienkie smugi.
W rozmazie krwi można zobaczyć komórki krwi. Wśród nich są:
Liczba erytrocytów lub czerwonych krwinek wynosi około 5 x 106 mm3 dla człowieka i 4,5 x 106 u kobiet. Czerwone krwinki mają kształt dwuwklęsłych dysków, z centralną fizjologiczną bladością. Można zobaczyć osobno (normalnie) lub ułożone w rouleaux (nienormalne).
W rozmazach występuje również poikilocytoza (krwinki czerwone o różnych kształtach), anizocytoza (krwinki czerwone o różnych rozmiarach), anizopoikilocytoza (różne kształty i rozmiary), anizochromia (różne kolory), erytroblasty (niedojrzałe krwinki czerwone), mikrocytoza (mniejsze krwinki czerwone)) i makrocyty (większe erytrocyty).
Kiedy wykazują niedobór ilości hemoglobiny i nasila się bladość centralna, mówi się, że występuje hipochromia. Kiedy zaobserwuje się normalną czerwoną serię, będzie ona opisana jako normocytarna i normochromiczna..
Normalna ilość waha się od 5 000 do 10 000 mm3. Zmieniają się w procesach zakaźnych, alergiach i białaczce. W rozmazie krwi można wyróżnić kilka typów, które wyjaśniono poniżej.
Stanowią 55-65% wszystkich leukocytów. Mierzą między 10-15 μm. Mają segmentowane lub płatkowe jądro, które przyjmuje różne morfologie, stąd nazywa się je polimorfojądrowe.
Mają obfite granulki neutrofilowe w swojej cytoplazmie i niektóre azurofily. Wzrost zakażeń bakteryjnych (neutrofilia), zmniejszenie zakażeń wirusowych (neutropenia).
Można zaobserwować nieprawidłowości morfologiczne, takie jak pleokariocytoza (jądra hiper-segmentacyjne), łuk (komórki niedojrzałe) lub makropolityki (owalne i duże)..
Inne zmiany:
-Toksyczne granulki
-Neutrofile Pseudo Pelgera (jądro jest jednopłatkowe lub dwupłatkowe).
-Ciała Döhle'a: ciemnoniebieskie wtręty cytoplazmatyczne.
-Zwiększona bazofilia cytoplazmatyczna.
-Wakuole wewnątrzcytoplazmatyczne.
-Pyknoza komórkowa (utrata mostków międzyjądrowych).
Stanowią 1-3% wszystkich białych krwinek. Mierzą 9-10 μm. Charakteryzują się obecnością obfitych kwasochłonnych ziarnistości cytoplazmatycznych i nielicznych azurofilów. Jego jądro ma dwa płaty. Ich liczba wzrasta w alergiach i chorobach pochodzenia pasożytniczego.
Są niezwykle rzadkie, stanowią 0-1% leukocytów. Mierzą 10-12 μm. Jądro ma zwykle nieregularne granice i może być dwupłatkowe, ale nie jest obserwowane z powodu dużej liczby zasadofilnych grubych granulek w jego cytoplazmie. Bardzo rzadko można zobaczyć bazofilia.
Są to małe komórki z bazofilną cytoplazmą, z dobrze zdefiniowanym, okrągłym jądrem, ze skondensowaną chromatyną. Jądro obejmuje prawie całą komórkę. Stanowią 26-40% leukocytów krwi. Nasilają się infekcje wirusowe (limfocytoza). Widoczne są reaktywne limfocyty.
Komórki większe niż limfocyty, z większą cytoplazmą i luźniejszym owalnym jądrem chromatyny. Mierzą 9-12 μm. Cytoplazma jest obfita i przy standardowych technikach barwienia zwykle wydaje się blado szaro-niebieska. Wśród zmian można zaobserwować wakuolowane monocyty i monocytozę..
Mierzą od 1,5 do 3 μm. Jego kształt jest okrągły lub owalny. Normalna wartość waha się od 150 000 do 350 000 płytek krwi / mm3. Mogą zmniejszyć niektóre infekcje wirusowe. Nie mają jądra i są zabarwione na fioletowo. W tej serii można zaobserwować nieprawidłowości, takie jak makro- lub mikropłytki krwi, trombocytoza lub trombocytopenia i fragmenty płytek krwi.
W rozmazach krwi można zobaczyć hemopasożyty, takie jak czynnik wywołujący malarię lub malarię (pasożyty z rodzaju Plasmodium). Z tego powodu ważne jest, aby rozmaz był analizowany ręcznie, ponieważ zautomatyzowany sprzęt pomija ten wynik..
W patologiach, takich jak nawracająca gorączka lub borelioza, można zaobserwować jej czynnik sprawczy. W tym przypadku odpowiada krętkom Borrelia recurrenti Jeszcze Borrelia burgdorferi w rozmazie krwi.
Ciężkie przypadki obserwuje się między innymi w białaczkach, reakcjach białaczkowych i reakcji leukoerytroblastycznej. W infekcjach bakteryjnych mogą występować niewielkie odchylenia w lewo (obecność oszustów). Erytroblasty można również zobaczyć w niektórych anemiach.
Jeszcze bez komentarzy