Plik agar odżywczy Jest to stałe, nieselektywne i niezróżnicowane podłoże hodowlane. Na tym podłożu rosną wszelkiego rodzaju bakterie, które nie są wymagające z żywieniowego punktu widzenia..
Jest to proste podłoże i pomimo swojej nazwy zawiera mniejszą wartość odżywczą w porównaniu z innymi podobnymi pożywkami, takimi jak Brain Heart Infusion Agar lub Trypticase Soy Agar..
Jego przydatność w laboratorium jest bardzo zróżnicowana. Głównie do subkultury gatunkowej, utrzymania szczepu, liczenia kolonii, jako podstawa do przygotowania agaru z krwią, m.in..
Podobnie, ze względu na jasnobeżowy kolor, produkcja pigmentów generowanych przez niektóre szczepy bakterii, takich jak zielonkawy pigment Pseudomonas aeruginosa, ceglastoczerwony pigment wytwarzany przez Serratia marcescens w temperaturze pokojowej złotożółty pigment Staphylococcus aureus, pośród innych.
Ponadto jest to jeden z najtańszych podłoży uprawowych na rynku..
Indeks artykułów
Jak już wspomniano powyżej, jest to bardzo proste podłoże, które polega na dostarczaniu składników odżywczych do wzrostu bakterii bez ograniczeń i bez skomplikowanych reakcji interpretacyjnych..
Ponieważ podłoże jest przezroczyste, jest idealne do liczenia kolonii metodą wysiewu na głębokość..
Zawiera głównie wyciąg z mięsa lub drożdży, peptony lub żelatynę, hydrolizat trzustkowy, agar-agar, chlorek sodu i wodę destylowaną..
Ekstrakt z mięsa lub drożdży oraz peptony stanowią podstawowe źródła węgla i minerałów (azotu, fosforu i siarki), które będą wykorzystywane przez bakterie jako źródło energii i czynników wzrostu..
Podobnie agar-agar jest podstawą wszystkich stałych pożywek hodowlanych, zastępując żelatynę, która była pierwszym podstawowym związkiem zastosowanym przez Roberta Kocha w celu nadania stałej konsystencji jego pożywkom..
Agar to polisacharyd złożony z galaktozy, galaktomannanu, agarozy i agaropektyny. Utwardza się w 40 ° C i topi się blisko 100 ° C.
Ze swojej strony chlorek sodu zapewnia pożywce osmolarność niezbędną do rozwoju bakterii.
Wreszcie woda służy do hydratacji i rozpuszczenia liofilizowanych związków. Należy używać wody destylowanej o pH neutralnym. Nie należy używać wody wodociągowej, ponieważ zawiera wapń i magnez, które mogą reagować z fosforanami w pożywce i tworzyć nierozpuszczalne sole..
Na jeden litr odżywczego agaru należy zważyć 31 g odwodnionej pożywki. Umieszcza się go w kolbie i rozpuszcza w litrze wody destylowanej. Po 5 minutach odstawienia podgrzać nad źródłem ciepła i ciągle mieszać do wrzenia przez 1 lub 2 minuty..
Kolbę następnie umieszcza się w autoklawie i sterylizuje w 121 ° C przez 20 minut..
Pod koniec czasu jest wyjmowany z autoklawu i podawany na sterylnych szalkach Petriego, przy użyciu okapu z przepływem laminarnym lub palnika Bunsena..
Jeśli szalki Petriego są jednorazowe (plastikowe), pożywkę należy rozprowadzić, gdy agar ma temperaturę około 50 ° C, aby zapobiec ich deformacji przez nadmierne ciepło.
Pozostawić do zestalenia i przechowywać na odwróconym uchwycie do płytek i przechowywać w lodówce w temperaturze 2–8 ° C do momentu użycia.
Talerze muszą być hartowane przed zaszczepieniem. Płytki z agarem odżywczym nie powinny być używane, jeśli są zanieczyszczone lub odwodnione.
PH przygotowanej pożywki należy ustawić na 7,3 ± 0,2.
Jest to najprostsza pożywka hodowlana stosowana w laboratorium mikrobiologicznym. Jego formuła jest doskonała do wzrostu niewymagających bakterii.
Jego główne zastosowania wyjaśniono poniżej:
Podłoże to jest czasami używane jako baza do przygotowania agaru z krwią, jednak nie jest to najczęściej używane podłoże..
Ta pożywka hodowlana jest szczególnie przydatna do stymulowania zarodnikowania bakterii tworzących przetrwalniki, takich jak Bacillus sp.
Aby to zrobić, szczep z rodzaju Bakcyl i inkubowano przez 24 godziny w 37 ° C w aerobiozie. Po wyrośnięciu kolonii płytkę poddaje się stresowi temperaturowemu, to znaczy temperaturę pieca podnosi się do 44 ° C i pozostawia na kolejne 24 godziny lub umieszcza w lodówce na 24 godziny.
Na koniec wykonuje się rozmaz kultury i barwi go barwnikiem Grama lub barwnikiem zarodników Shaeffer-Fulton. W nich będą obserwowane pałeczki z przetrwalnikami (zarodniki wewnątrz Bacillus) i egzospory (zarodniki na zewnątrz Bacillus)..
Niektóre laboratoria badawcze lub uniwersyteckie laboratoria wspierające nauczanie wymagają utrzymywania żywotnych bakterii o znaczeniu klinicznym tak długo, jak to możliwe, w celu wykorzystania banku bakterii (bakterioteca) do prac badawczych lub do przygotowania praktyk dydaktycznych, podczas których studenci nauczą się manipulować i zidentyfikować te mikroorganizmy.
W tym celu można zastosować agar odżywczy, jak również agar infuzyjny mózg-serce. Agar jest przygotowany, wlewany do probówek z bakelitową pokrywką i przechylany na podstawie w taki sposób, aby agar zestalił się tworząc blok na dnie i fazę na powierzchni (dziób fletowy).
Każda probówka jest oznaczona nazwą bakterii, które mają być wysiane, oraz datą. Każda z bakterii zostanie wysiana na ramce i inkubowana przez 24 godziny, gdy kolonie wyrosną, probówki są przechowywane w temperaturze pokojowej.
Bakterioteca należy odnawiać od 1 do 3 miesięcy, aby uniknąć zanieczyszczenia i odwodnienia podłoża, a także śmierci bakterii.
W ten sposób można utrzymać tylko nie-wybredne bakterie.
Chociaż istnieją wyspecjalizowane środki do liczenia kolonii, takie jak standardowy agar do liczenia, do tego celu można użyć agaru odżywczego, poprzez wysiew powierzchniowy szpatułką drigalskiego lub na głębokość. Z tego powodu jest bardzo przydatny w analizie mikrobiologicznej żywności i wody..
Ponieważ jest to podłoże, które nie zawiera krwi ani żadnego innego dodatku, jest idealne do pobrania kolonii wyrosłych na tym podłożu w celu wykonania testu na katalazę..
Podobnie, ze względu na jasną barwę, wskazane jest przeprowadzanie testów oksydazowych bezpośrednio na powierzchni zaszczepionego agaru, bez ingerencji..
Agar odżywczy przygotowany z 10% wody morskiej jest przydatny do oceny aerobów mezofilnych w wodach plaży..
W ten sposób można ocenić rzeczywisty poziom zanieczyszczenia wody tymi mikroorganizmami, ponieważ w tego typu próbkach wyniki nakładają się, gdy stosuje się pożywki hodowlane przygotowane w konwencjonalny sposób..
Wykazali to Cortez i wsp. w 2013 roku w pracy naukowej.
Można to wytłumaczyć nagłą zmianą, jaką przechodzą bakterie podczas przechodzenia ze środowiska przesolonego do środowiska o niskiej zawartości soli, dlatego mikroorganizmy wchodzą w stan letargu, w którym są zdolne do życia, ale nie nadają się do hodowli..
Jeszcze bez komentarzy