Plik jasnozielony agar Jest to pożywka stała o wysokim stopniu selektywności. Służy wyłącznie do izolacji szczepów z rodzaju Salmonella, jednak są pewne wyjątki, takie jak gatunki typhi i paratyphi, które nie rosną na tym podłożu..
Poszukiwanie rodzaju Salmonella jest częste w próbkach kału, wody lub pożywienia. W tym sensie to medium może być bardzo przydatne. Ten agar został stworzony w 1925 roku przez Kristensena, Lestera i Jurgensa, później został zmodyfikowany przez Kauffmanna.
Składa się z pluripeptonów z trawiennego trawienia tkanki zwierzęcej i trzustkowego hydrolizatu kazeiny, zawiera również ekstrakt drożdżowy, chlorek sodu, laktozę, sacharozę, czerwień fenolową, jasnozielony i agar-agar..
Charakteryzuje się raczej niegościnnym środowiskiem dla większości bakterii, sprzyjającym rozwojowi Salmonelli, jednak niektóre bakterie z grupy coli mogą w nim przetrwać, rozwijając się słabo.
Należy zauważyć, że rodzaj Shigella nie rośnie w tym środowisku i też nie Salmonella typhimurium, ani Salmonella paratyphi. Dlatego chcąc wyizolować te mikroorganizmy, warto skorzystać z innych podłoży, takich jak między innymi agar XLD..
Indeks artykułów
Każdy ze składników tworzących podłoże spełnia określoną funkcję, która określa cechy i właściwości agaru..
Pluripeptones i wyciąg z drożdży są źródłem składników odżywczych, z których mikroorganizmy pobierają niezbędny do ich rozwoju azot i minerały. Laktoza i sacharoza to źródła energii dla mikroorganizmów zdolnych do ich fermentacji..
Jasnozielona to substancja hamująca, która zapobiega rozwojowi bakterii Gram-dodatnich i dużej liczby mikroorganizmów Gram-ujemnych..
Chlorek sodu zapewnia pożywce stabilność osmotyczną. Podczas gdy czerwień fenolowa jest wskaźnikiem pH, zmienia kolor przy wykrywaniu produkcji kwasów podczas fermentacji węglowodanów..
Niefermentujące kolonie laktozy i sacharozy rosną na tym podłożu w różowawym lub przezroczystym białym kolorze na czerwonym tle. Na przykład bakterie z rodzaju Salmonella.
Podczas gdy bakterie fermentujące laktozę lub sacharozę zdolne do wzrostu na tym podłożu tworzą zielonkawożółte lub żółtawozielone kolonie na zielono-żółtym tle. Na przykład, Escherichia coli i Klebsiella pneumoniae.
Istnieją inne warianty jasnozielonego agaru; Agar z zieloną brylantową nowobiocyną i glukozą (NBG) oraz agar z zieloną brylantową nowobiocyną i glicerolem z laktozą (NBGL).
Zawiera agar sojowy tryptykazowy, cytrynian amonu żelazowego, pentahydrat tiosiarczanu sodu, czerwień fenolową, glukozę, jasnozielony, nowobiocynę i wodę destylowaną.
Służy do izolacji kolonii Salmonella z próbek kału.
W tym przypadku jasnozielone i nowobiocyna są substancjami hamującymi, które zapobiegają rozwojowi bakterii Gram-dodatnich i niektórych mikroorganizmów Gram-ujemnych..
Tiosiarczan sodu jest źródłem siarczku, a cytrynian żelazowy jest źródłem żelaza, które są niezbędne do ujawnienia produkcji siarkowodoru poprzez tworzenie się czarnego osadu siarczku żelazowego..
Glukoza jest węglowodanem ulegającym fermentacji, a czerwień fenolowa jest wskaźnikiem pH..
Na tym podłożu kolonie Salmonella rozwijają się jako duże, z czarnym środkiem otoczonym czerwonawym halo, po którym następuje wyraźny widoczny obszar. Niektóre odmiany Citrobacter freundii wytwarzają kolonie identyczne jak Salmonella.
To podłoże zawiera agar tryptykazowo-sojowy, cytrynian amonu żelaza (III), tiosiarczan sodu, laktozę, glicerol, jasnozielony, nowobiocynę i wodę destylowaną..
Różnica między tą pożywką a poprzednią polega na tym, że glukozę zastępuje laktoza i glicerol, a czerwień fenolowa nie jest używana..
Pożywka służy również do izolowania gatunków Salmonella, kolonie stają się czarne z powodu produkcji siarkowodoru.
Tylko kolonie, które nie wytwarzają kwasu z glicerolu lub laktozy, osiągają produkcję HdwaJest to wystarczające, ponieważ niskie pH przeszkadza w tworzeniu się H.dwaS. Powoduje to bezbarwne kolonie dla większości gatunków Proteus i Citrobacter..
-Odważ 58 gramów komercyjnie otrzymanego odwodnionego podłoża. Dodaj do litra wody redestylowanej. Wymieszaj, odstaw na kilka minut i umieść preparat pod źródłem ciepła, aż całkowicie się rozpuści..
-Autoklawuj w 121 ° C przez 15 minut, nie przekraczaj czasu sterylizacji.
-Odstawić i podawać na gorąco na sterylnych szalkach Petriego. Końcowe pH powinno wynosić 6,9 ± 0,2.
-Pozostawić do zestalenia i przechowywać w lodówce do czasu użycia. Przed wysianiem płytki powinny mieć temperaturę pokojową.
-Podłoże w proszku jest koloru zielonego i przygotowane przybiera kolor pomarańczowo-brązowy lub czerwono-zielony, w zależności od pH i firmy handlowej. Bardzo brązowy kolor wskazuje na przegrzanie agaru..
-Gdy agar zestali się, nie zaleca się ponownego ubijania ze względu na degradację pożywki..
Podłoże to służy do wyszukiwania szczepów z rodzaju Salmonella m.in. w próbkach kału i produktach mlecznych..
Ponieważ jest to raczej niegościnne środowisko, zaleca się zasianie obfitego inokulum, jeśli używana jest próbka bezpośrednia. W przeciwnym razie należy przeprowadzić wstępne wzbogacenie i wzbogacenie okazów przed wysianiem na tym podłożu..
Ponieważ niektóre szczepy Salmonella są hamowane lub rosną z trudnością, zaleca się uzupełnienie tego podłoża innym selektywnym agarem dla Salmonelli..
Każda kolonia o typowej charakterystyce Salmonelli musi zostać poddana testom biochemicznym w celu ostatecznej identyfikacji..
Aby przetestować dobre działanie jasnozielonego podłoża agarowego, można zastosować szczepy ATCC do obserwacji ich rozwoju na nim..
Najczęstsze szczepy używane do kontroli jakości to: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922, Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.
Pierwsze 3 powinny dać różowawe lub przezroczyste białe kolonie na czerwonym tle. Salmonella z dobrym rozwojem i Proteus ze słabym lub regularnym wzrostem.
W przypadku Klebsiella i Escherichia spodziewane są kolonie zielonkawożółte z żółtym tłem, aw przypadku Shigella i Staphylococcus należy je hamować.
Odwodnione podłoże należy przechowywać w temperaturze pokojowej, w suchym miejscu, ponieważ jest ono bardzo higroskopijne.
Jeszcze bez komentarzy