Plik Kongo czerwony jest barwnikiem azowym dla białek, powstałym w wyniku połączenia soli diazoniowej i aktywnego pierścienia aromatycznego. Substancja ta ma zdolność pochłaniania promieniowania elektromagnetycznego w zakresie widzialnym, dlatego ma intensywny kolor.
Jest naładowany ujemnie. Dlatego ma powinowactwo do dodatnio naładowanych składników komórkowych, takich jak niektóre substancje białkowe. Jego kolor zmienia się w zależności od pH. W tym sensie, jeśli medium jest kwaśne (< de pH3), el color es azul intenso. Entre pH3 - pH 5,2 es fucsia (zona de viraje), y con >pH 5,2 kolor ciemnoczerwony.
Jest to bardzo wszechstronna substancja, ponieważ ma wiele zastosowań. Był używany jako barwnik w przemyśle tekstylnym, a także do komórek i tkanin.
Również do wykonywania pożywek hodowlanych mierzących aktywność enzymatyczną, jako wskaźnika pH, jako substancji kontrolnej w ocenie prawidłowego funkcjonowania spektrofotometrów, w badaniu tworzenia się biofilmu lub w diagnostyce amyloidu..
Umożliwiło również rozróżnienie serotypów bakterii i grzybów poprzez identyfikację określonych struktur w ich ścianach (lipopolisacharydy)..
Indeks artykułów
Substancja ta została odkryta przez Böttigera w 1884 roku. Jest to pochodna diazoniowa utworzona przez kwas bis-diazowy benzydyny z kwasem nafciowym. Cząsteczka czerwieni Kongo mierzy 21 Armstronga, a masa cząsteczkowa wynosi około 8000 g / mol..
Czerwień Kongo charakteryzuje się rozpuszczalnością w wodzie, a tym bardziej w rozpuszczalnikach organicznych, takich jak etanol, tworząc roztwór koloidalny.
Ma powinowactwo do celulozy, tkanki amyloidowej i dodatnio naładowanych składników komórkowych.
Czerwień Kongo jest przygotowywana w różnych stężeniach w zależności od stosowanej techniki. Najczęściej używa się między innymi czerwieni Kongo na poziomie 1%, 2%, 0,1%.
Na przykład, aby przygotować 2% czerwieni Kongo, należy odważyć 2 g odwodnionego barwnika spożywczego i dodać 100 ml wody destylowanej. Następnie jest przechowywany w bursztynowej butelce.
Przez pewien czas był szeroko stosowany w przemyśle tekstylnym ze względu na wiązanie z bawełną, ale obecnie jest nieużywany, ponieważ jest rakotwórczy, a także dlatego, że kolor nie jest trwały, odbarwiając się w wyniku tarcia..
Wykazano, że zdolność mikroorganizmów do tworzenia biofilmu jest czynnikiem zjadliwości.
W tym sensie czerwony barwnik Kongo jest stosowany jako metoda określania tworzenia się biofilmu. Czerwień Kongo wiąże się z egzopolisacharydami obecnymi w biofilmie. Jednak w porównaniu z innymi metodami jest najmniej zalecana ze względu na występujące wysokie wyniki fałszywie ujemne.
Metoda wykorzystuje czerwony agar Kongo, składający się z agaru z krwią jako bazy, glukozy (10 g / l) i czerwonego barwnika Kongo (0,4 g / l). Oceniane szczepy wysiewa się w pożywce i inkubuje przez 24 godziny w 37 ° C, a następnie inkubuje przez 48 godzin w temperaturze pokojowej..
Pozytywny wynik testu jest potwierdzony, jeśli obserwuje się krystaliczne kolonie o czarnym zabarwieniu i suchym wyglądzie.
Aby ocenić, czy urządzenie do pomiaru absorbancji lub transakcji jest zgodne z parametrami fotometrycznymi ustalonymi w przepisach międzynarodowych, można zastosować prostą technikę do ustalenia, czy urządzenie emituje wyniki mieszczące się w dopuszczalnych zakresach..
Jedną z technik oceny jest użycie czerwieni Kongo w oparciu o punkt izosbesowy.
Punkt izosbesowy to długość fali, przy której czerwień Kongo emituje taką samą absorbancję niezależnie od pH, stężenia i temperatury. Wartość absorbancji jest stała i może służyć jako odniesienie.
Wiadomo, że teoretyczny punkt izosbesowy czerwieni Kongo wynosi 541 nm. Jeśli uzyskana wartość jest inna, wiadomo, że sprzęt ma problemy z dryfem długości fali i musi zostać sprawdzony przez wyspecjalizowanego technika..
Ortiz i wsp. Opisują pożywkę hodowlaną przygotowaną z czerwonym barwnikiem Kongo i karboksymetylocelulozą, zwaną agarem CMC, w celu wykrycia szczepów drobnoustrojów cellulitu; czyli producenci celulaz (endoglukony, egzoglukanazy i ß-glukozydazy).
To podłoże ma intensywne zabarwienie. Kolor zostanie rozproszony przez działanie enzymu endoglukanazy, który łamie strukturę karboksymetylocelulozy. Sugeruje to pozytywną reakcję.
Spadek lepkości i absorbancji pozwala na ilościowe określenie aktywności enzymu. Na przykład w szczepach Streptomyces sp.
Czerwień Kongo wykazuje powinowactwo do struktur polisacharydowych niektórych szczepów, umożliwiając identyfikację tych mikroorganizmów. Wśród nich są Escherichia coli, i Shigella flexneri.
Szalki z czerwonym agarem Kongo są również używane do uzyskania charakterystycznych kolonii, jak ma to miejsce w przypadku Azospirillum sp, dając szkarłatne czerwone kolonie, m.in.
Jednym z najczęstszych zastosowań czerwieni Kongo jest jej przydatność w diagnostyce amyloidozy. Ta dziwna choroba polega na zewnątrzkomórkowej akumulacji nieprawidłowego białka w różnych narządach. To nieprawidłowe białko jest wytwarzane w szpiku kostnym i nazywane jest amyloidem..
Czerwień Kongo ma duże powinowactwo do tej substancji. Ta właściwość została wykorzystana do wykazania jej obecności w histologicznych skrawkach tkanek. W tym celu używa się czerwieni Kongo w połączeniu z hematoksyliną / eozyną..
Połączenie tkanki amyloidu i czerwieni Kongo zachodzi poprzez niepolarne wiązania wodorowe między grupami karboksylowymi i aminowymi. Białko amyloidowe dostarcza grupy karboksylowe (COOH), a czerwień Kongo - grupę aminową.
Tkanka amyloidu jest barwiona pod mikroskopem świetlnym na różne odcienie, od różowego do głębokiej czerwieni. W mikroskopach z podwójnie spolaryzowanym światłem preparaty te są obserwowane z patognomoniczną dwójłomnością zielonego jabłka..
Oznacza to, że wykazują dichroizm, ponieważ włókna amieloidalne są anizotropowe. Ta obserwacja potwierdza diagnozę.
Barwienie tkanek czerwienią Kongo jest zgodne z innymi metodami diagnostycznymi, takimi jak metody immunocytochemiczne, a nawet możliwe jest ponowne zabarwienie.
Właściwość zwracania się przeciwko zmianom pH jest wykorzystywana przez technikę zwaną chromoendoskopią..
Technika ta wykorzystuje barwniki i wskaźniki pH, które pozwalają na wykrycie pewnych patologii. Wśród nich jest zastosowanie czerwieni Kongo, która może ujawnić wczesne ogniska raka w błonie śluzowej żołądka i jest używana jako marker kwasowości.
Technika opiera się na fakcie, że czerwień Kongo przy kwaśnym pH jest czarna. Dlatego po umieszczeniu roztworu czerwieni Kongo na błonie śluzowej żołądka, obszary, w których jest bladość, zostaną wybrane do pobrania próbki do biopsji, czyli takie, w których nie ma wytwarzania kwasu. Sugeruje to obecność ogniska rakowego lub utratę komórek okładzinowych..
Jeszcze bez komentarzy