Charakterystyka, przygotowanie i zastosowania tymoloftaleiny

3279
Egbert Haynes

Plik tymoloftaleina jest wskaźnikiem pH, którego nazwa naukowa to: 3,3-bis [4-hydroksy-2-metylo-5- (1-metylo) fenylo] -1 (3H) -izobenzofuranon, a jego wzór chemiczny to C28H.30LUB4. Jest syntetyzowany z bezwodnika ftalowego i tymolu.

Ten wskaźnik pH ma bardzo szczególne właściwości, ponieważ przy skrajnie niskim pH jest intensywnie czerwony (pH < 0). Posteriormente hay un amplio rango de pH en donde es completamente incoloro (pH 1 - 9,2), con un rango de viraje entre 9,3 a 10,5 donde puede cambiar a azul, mientras que por encima de 10,5 es azul intenso.

Struktura chemiczna tymoloftaleiny przy kwaśnym pH (bezbarwny) i zasadowym pH (ciemnoniebieski). Źródło: Dannybalanta [CC BY-SA 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0)♡/Pxhere.com

Jego zastosowania obejmują służenie jako wskaźnik kwasowo-zasadowy w niektórych reakcjach chemicznych. Jest również używany jako chromogen w niektórych reakcjach kolorymetrycznych, w których ocenia się aktywność enzymatyczną. Na przykład przy oznaczaniu fosfatazy alkalicznej.

Jeśli chodzi o toksyczność, jest mniej szkodliwy niż inne wskaźniki pH, sklasyfikowany przez National Fire Protection Association (NFPA) jako poziom 1 w odniesieniu do jego wpływu na zdrowie; co oznacza, że ​​nie jest rakotwórczy ani mutagenny.

Nie wykazuje również specyficznej toksyczności w stosunku do żadnego narządu docelowego; to znaczy, że stwarza niskie ryzyko agresji dla zdrowia. Jednak bezpośredni kontakt ze skórą i błonami śluzowymi może powodować lekkie podrażnienie..

Z drugiej strony pod względem palności jest klasyfikowany jako 1, a pod względem reaktywności jako zero..

Indeks artykułów

  • 1 Funkcje
  • 2 Przygotowanie
  • 3 Aplikacje
    • 3.1 Oznaczanie fosfatazy alkalicznej
    • 3.2 Oznaczanie antygenu prostaty (PSA)
    • 3.3 Oznaczanie aktywności enzymu kinazy argininowej lub fosfokinazy
  • 4 Toksyczność
    • 4.1 U ludzi
    • 4.2 Oddziaływanie na środowisko
  • 5 Referencje

Charakterystyka

Wskaźnik pH tymoloftaleina w postaci stałej jest białym proszkiem, w stanie ciekłym jest intensywnie czerwony przy pH poniżej zera, bezbarwny przy pH 1-9,2 i niebieski powyżej 10,5. Jego masa molowa wynosi 430,54 g / mol, temperatura topnienia (258 ° C), a temperatura wrzenia 248-252 ° C. Gęstość wynosi 0,92 g / ml w 25 ° C

Jest nierozpuszczalny w zimnej wodzie i rozpuszczalny w etanolu. Nie jest to substancja wybuchowa.

W ramach środków ostrożności podczas transportu, przechowywania i przenoszenia należy trzymać z dala od silnych utleniaczy.

Przygotowanie

Do analizy wolumetrycznej na ogół stosuje się wskaźnik pH tymoloftaleiny w stężeniu 0,1%. Aby to zrobić, wykonaj następujące czynności:

- Odważyć 100 mg tymoloftaleiny i rozpuścić w 100 ml 95% alkoholu etylowego.

Można go również przygotować w następujący sposób:

- Odważyć 100 mg tymoloftaleiny i rozpuścić w 60 ml alkoholu absolutnego i dodać 40 ml wody destylowanej.

- Przechowywać w temperaturze pokojowej (15-25 ° C). Ważne jest, aby miejsce przechowywania było chłodne, wentylowane i wolne od wilgoci.

Aplikacje

Oznaczanie fosfatazy alkalicznej

Przy określaniu tego testu istnieje technika oparta na hydrolitycznym działaniu fosfatazy alkalicznej na monofosforan tymoloftaleiny. Jeśli fosfataza alkaliczna jest obecna, hydrolizuje monofosforan tymoloftaleiny, uwalniając tymolthaleinę.

Daje to niebieski odcień przy zasadowym pH. Aktywność enzymatyczna fosfatazy alkalicznej jest wprost proporcjonalna do intensywności powstałego koloru. Absorbancję odczytuje się przy 590 nm.

Oznaczanie antygenu prostaty (PSA)

W tym sensie Shao F i współpracownicy w 2018 roku opracowali technikę kolorymetryczną, w której wykorzystują mezoporowate nanocząsteczki krzemionki, które wychwytują cząsteczki tymoloftaleiny, które są silnie związane przez obecność fenylotrimetyloksysilanu..

Z kolei te nanocząstki zostały pokryte polietylenoiminą (PEI), co sprzyja wiązaniu drugorzędowego przeciwciała anty-PSA..

Z drugiej strony próbka pacjenta została unieruchomiona na płytce; a kiedy obecny PSA wejdzie w kontakt z nanocząsteczkami, zwiąże się z przeciwciałami. Nanocząsteczki, które się nie wiążą, zostaną usunięte.

Następnie tymoloftaleina będzie łatwo uwalniana przez dodanie roztworu alkalicznego, który generuje niebieskie zabarwienie. Stopień zabarwienia jest wprost proporcjonalny do stężenia PSA.

Oznaczanie aktywności enzymu kinazy argininowej lub fosfokinazy

Za pomocą wskaźnika pH, tymoloftaleiny, można określić aktywność enzymatyczną kinazy argininowej. Test opiera się na następujących zasadach:

Enzym kinaza argininowa jest fosfotransferazą, która uczestniczy w tworzeniu fosfoargininy, co ujawnia się w następującej reakcji chemicznej:

Źródło: „kinaza argininowa”. Wikipedia, wolna encyklopedia. 10 lipca 2018, 13:49 UTC. 20 maja 2019, 03:58 wikipedia.org/

Jeśli ta reakcja jest prowadzona względem wskaźnika pH, tymoloftaleiny, można zmierzyć aktywność enzymu. Jest to możliwe zgodnie z następującym wyjaśnieniem: reakcja zachodzi przy zasadowym pH, w którym tymoloftaleina będzie miała niebieski kolor..

Aktywność enzymatyczną mierzy się blaknięciem barwy odzwierciedloną spadkiem absorbancji przy 575 nm, ponieważ podczas działania enzymu uwalniane są protony (H +), które zakwaszają środowisko..

Powoduje to, że tymoloftaleina traci kolor, gdy zbliża się do strefy skrętu. Jeśli pH spadnie poniżej 9,2, staje się całkowicie bezbarwny.

Dlatego intensywność koloru niebieskiego jest odwrotnie proporcjonalna do aktywności enzymatycznej.

Toksyczność

W człowieku

Związek ten jest mniej toksyczny niż większość wskaźników pH, ponieważ do tej pory nie przypisywano mu żadnych skutków rakotwórczych ani mutagennych. Jednak nie jest to całkowicie nieszkodliwe: w kontakcie ze skórą i błonami śluzowymi może powodować zaczerwienienia w wymienionych miejscach..

Może również powodować niepożądane reakcje, jeśli zostanie przypadkowo połknięty lub wdychany..

W przypadku bezpośredniego kontaktu ze skórą i błonami śluzowymi dotknięty obszar należy przemywać dużą ilością wody przez co najmniej 15 minut. A jeśli zauważą oznaki podrażnienia, powinni udać się do najbliższej przychodni.

Dlatego podczas obsługi zaleca się używanie narzędzi ochronnych, takich jak fartuch, rękawice i okulary ochronne.

Pomimo niskiego ryzyka łatwopalności, zaleca się, aby zachować ostrożność, aby trzymać się z dala od zapalniczek.

Wpływ na środowisko

Mimo że jest mniej toksyczny dla zdrowia ludzkiego, jest toksyczny w środowisku wodnym, wpływając na występujące tam organizmy. Dodatkowo posiada dużą zdolność do bioakumulacji, aw dłuższej perspektywie może dojść do powstania szkodliwych dla środowiska produktów degradacji..

Dlatego należy unikać przedostawania się tego produktu do wód powierzchniowych lub podziemnych, ponieważ miałby on wpływ na wodę pitną.

W tym sensie laboratoria, które stosują ten wskaźnik, muszą utylizować swoje odpady zgodnie z przepisami obowiązującymi w każdym kraju..

Bibliografia

  1. Pizzani P, Godoy S, León M, Rueda E, Castañeda M, Arias A.Wpływ rosnących stężeń Phytic Phosphorus na aktywność enzymów fitazy i fosfatazy alkalicznej w nabłonku jelitowym młodych owiec. Wielebny Cient. (Maracaibo). 2008.18 (1): 59–64. Dostępne pod adresem: scielo.org.
  2. „Tymoloftaleina”. Wikipedia, wolna encyklopedia. 22 lutego 2019 r., 04:40 UTC. 19 maja 2019, 22:20, es.wikipedia.org.
  3. Shao F, Zhang L, Jiao L, Wang X, Miao L, Li H, Zhou F. Enzyme-Free Immunosorbent Assay of Prostate Specific Antigen Amplified by Releating pH Indicator Molecules uwięzione w mezoporowatych nanocząstkach krzemionki. Anal Chem.2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
  4. Yu Z, Pan J, Zhou HM. Bezpośredni ciągły test spektrofotometryczny pH dla aktywności kinazy argininowej. Protein Pept Lett. 2002; 9 (6): 545–52.
  5. Scharlau. Karta charakterystyki tymoloftaleiny. 2013 Dostępne pod adresem: javeriana.edu.co
  6. Karta charakterystyki tymoloftaleiny. MSDS. National University of Heredia, Kostaryka. Dostępny w: Tymoloftaleina% 20 (3).
  7. „Kinaza argininowa”. Wikipedia, wolna encyklopedia. 10 lipca 2018, 13:49 UTC. 20 maja 2019, 03:58 en.wikipedia.org.

Jeszcze bez komentarzy